1 色譜柱規(guī)格
產(chǎn)品名稱 | 理論塔板數(shù) | 基 質(zhì) | 分離模式 | 抗衡離子 | 排阻限 | 尺寸I.D.×L(mm) |
KS-801 | 17,000 以上 | 苯乙烯-二乙烯基苯共聚物 | SEC+配位體交換 | 磺基(Na2+) | 1,000 | 8.0×300 |
產(chǎn)品名稱 | 粒徑(μm) | 最大耐壓(MPa) | 常用流量(mL/min) | 最大使用流量(mL/min) | 使用溫度范圍(℃) | 出廠時(shí)溶劑 |
KS-801 | 6 | 5.0 | 0.5~1.0 | 1.5 | ~85 | H2O |
標(biāo)準(zhǔn)使用條件:流動(dòng)相 H2O;流量 0.5~1.0 mL/min;色譜柱溫度 50~85℃
2 使用注意事項(xiàng)
Shodex SUGAR KS-801 可以只用水作流動(dòng)相,對(duì)單糖、二糖、寡糖、多糖及糖醇等碳水化
合物或非離子性的水溶性物質(zhì)進(jìn)行分離。
Ⅰ 使用注意事項(xiàng)
(1)操作上注意
1)作為流動(dòng)相的脫離子水,用0.45μm 的過濾器過濾,加熱到60℃后,放入超聲波清洗器中,邊超聲邊減壓充分脫氣。使用了在線脫氣機(jī)的話可省略前面的脫氣操作。
2)避免突然壓力或流量的改變。
不要超過色譜柱的壓力上限。超過壓力上限的話會(huì)使性能降低,無法回復(fù)。
3)糖類在色譜柱溫度60℃以上分析分離效果好。但不要超過85℃
4)樣品親水性高會(huì)引起吸附,使保留體積增大。此時(shí)在流動(dòng)相中添加乙醇、乙腈等極性有機(jī)溶劑,可減少保留體積。要注意添加有機(jī)溶劑的濃度要在20%以下。
5)流動(dòng)相去離子水中如果混有有機(jī)物或金屬離子的話,會(huì)導(dǎo)致糖峰形變寬。
(2)安裝色譜柱
1)色譜柱安裝之前請(qǐng)用分析用流動(dòng)相對(duì)裝置進(jìn)行完全置換。
2)如果裝置中使用了與水不互溶的有機(jī)溶劑的話,首先用丙酮、乙醇等與水互溶的有機(jī)溶劑置換后再置換成水。
3) 如果使用了進(jìn)樣環(huán),請(qǐng)別忘記對(duì)進(jìn)樣環(huán)中的溶劑和空氣進(jìn)行置換。
4)色譜柱連接時(shí)注意避免空氣混入。
(3)色譜柱拆取與保存
1)色譜柱加熱使用后,在保持0.2mL/min 送液狀態(tài)下色譜柱冷卻至室溫。
2)色譜柱從裝置中取下后,放在溫度波動(dòng)不大(18~28℃)的場(chǎng)所保存。
絕對(duì)要避免色譜柱內(nèi)溶劑凍結(jié)現(xiàn)象的發(fā)生。
Ⅱ 樣品前處理
(1)樣品用流動(dòng)相溶解。
(2)樣品溶液與流動(dòng)相不同時(shí),進(jìn)樣后會(huì)生成沉淀,堵塞色譜柱的情況。
為了降低溶劑峰,樣品盡量用與流動(dòng)相相同的溶劑來溶解。
(3)樣品是水溶性,并且含有乙醇等有機(jī)溶劑時(shí),要用水將有機(jī)溶劑濃度稀釋到20%
以下。
(4)樣品含有蛋白質(zhì)時(shí),要除去蛋白質(zhì)。
樣品溶液約5mL 中加入數(shù)滴磺基水楊酸溶液(20g/dL)混合后,再用0.45μm 過濾器過濾。
3 色譜柱性能的測(cè)試方法
按照下面的條件,對(duì)色譜柱進(jìn)行性能測(cè)試(詳情請(qǐng)參考色譜柱附帶的出廠檢查報(bào)告COA)
色譜柱 | 流動(dòng)相 | 流量 | 色譜柱溫度 | 樣品 | 注入量 |
KS-801 | H2O | 1.0mL/min | 50℃ | 1%乙二醇 | 5μL |
4 色譜柱的再生
如果色譜柱吸附了不純物,果糖或葡萄糖的峰會(huì)變寬。
可按照下面的操作對(duì)色譜柱進(jìn)行再生。
色譜柱 | 再生液 | 色譜柱溫度 | 操作 |
KS-801 | 0.01NNaOH 水溶液 | 50℃ | 0.5mL/min 送液 |
再生后請(qǐng)置換成去離子水。
(也可用0.1N NaOH 水溶液進(jìn)樣40μL 的方法來進(jìn)行再生)