XSELECT HSS XP色譜柱的清洗、再生和儲存
a. 清洗與再生
如果峰形改變、峰分叉、出現肩峰、保留時間改變、分離度變化或柱壓升高,說明色譜柱可能已被污染。使用純有機溶劑進行沖洗以去除非極性污染物,小心避免任何緩沖液組分出現沉淀。如果沖洗不能解決問題,可采用以下清洗和再生步驟再生色譜柱。
請使用與樣品性質和固定相類型(反相、正相或HILIC)相匹配,并且能夠溶解可疑污染物的常規(guī)清洗溶劑。使用20倍柱體積的溶劑在45 ℃條件下沖洗色譜柱。反轉清洗序列以返回初始流動相條件。
如果使用反相色譜柱,可利用一系列極性遞減的溶劑(如,水-甲醇-四氫呋喃-二氯甲烷)清洗色譜柱。
如果使用HILIC色譜柱,可利用一系列極性遞增的有機溶劑(如,乙腈-乙腈/甲醇-乙腈/水-水)清洗色譜柱。
如果色譜柱性能在清洗/再生后仍然很差,請聯(lián)系當地的沃特世銷售代表獲得更多支持。
b. 反相分析后儲存色譜柱
如果XP 2.5μm色譜柱需要存放超過四天,應將其保存于100%乙腈中。完成高溫條件下的分離后,應立即將色譜柱保存于100%乙腈中。切勿使用緩沖液保存色譜柱。如果流動相中含有緩沖鹽,則先用10倍柱體積的HPLC級水/有機相沖洗色譜柱(色譜柱體積信息請參閱表3),再用10倍柱體積的乙腈沖洗。
如果不執(zhí)行這個中間步驟,在引入100%乙腈時,色譜柱內可能會出現緩沖鹽沉淀。將色譜柱完全密封,防止柱床因溶劑蒸發(fā)而變干。
注:如果色譜柱運行了含甲酸鹽(如,甲酸銨、甲酸等)的流動相,并且之后使用100%乙腈進行沖洗,那么在重新安裝色譜柱并使用含相同甲酸鹽的流動相重新浸潤時,柱平衡花費的時間可能稍微有點長。
c. 正相分析后儲存色譜柱
如需在啟動后迅速達到平衡,請將XP 2.5μm色譜柱保存于正相分離時常用的流動相中(即己烷/異丙醇)。將色譜柱完全密封,防止柱床因溶劑蒸發(fā)而變干。