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Waters Styragel色譜柱的保養(yǎng)和維護(hù)

更新時間:2024-08-23      點(diǎn)擊次數(shù):300

Waters Styragel色譜柱的保養(yǎng)和維護(hù)

 

本章介紹了:

■ 故障排查

■ 色譜柱保存

■ 效率測試

a.故障排查

3描述了具體問題、原因和糾正措施。

問題

原因

糾正措施

系統(tǒng)操作壓力增加

入口過濾器濾芯(僅第一根色譜柱)被顆粒堵塞。

進(jìn)樣器和泵密封件脫落。

更換入口過濾器濾芯。

安裝Styragel預(yù)柱。

在泵與第一根色譜柱之間安裝在線過濾器。

分離度下降,色譜峰展寬,

塔板數(shù)減少

管件堵塞

更換管件

過濾器濾芯部分堵塞

更換或清洗入口和/或出口過濾器濾芯

進(jìn)樣器故障

維修進(jìn)樣器

平衡不足

繼續(xù)平衡

色譜柱損壞

更換色譜柱

3. 色譜柱故障排查。

 

b. 色譜柱保存

如果您打算在24小時內(nèi)再次使用色譜柱,則無需進(jìn)行特殊的保存。但是,應(yīng)確保色譜柱不得變干。如果儲存時間較長,請將色譜柱放回其包裝盒中,并塞緊端塞進(jìn)行儲存。在沒有溶劑流動的情況下,請勿將色譜柱置于高溫環(huán)境中。

為獲得最長的色譜柱壽命,應(yīng)避免溫度循環(huán)變化。色譜柱未使用時,應(yīng)維持在運(yùn)行溫度,并將流速降低至0.1 mL/min。

要重啟色譜柱,將流速維持在0.1 mL/min,并且(如果適用)在10小時內(nèi)將溫度逐漸升高。然后將流速設(shè)置為所需的操作流速。

 

c. 效率測試

沃特世色譜柱經(jīng)過測試,符合我們的指標(biāo)。柱效隨下列條件不同可能略有變動:

■ 所用設(shè)備的類型和條件

■ 樣品性質(zhì)

■ 儀器設(shè)置

執(zhí)行效率測試。為了測試系統(tǒng)及系統(tǒng)中的每根色譜柱,須執(zhí)行以下兩種測試:

■ 儀器譜帶展寬測試

■ 柱效測試

 

何時執(zhí)行效率測試

每次增加色譜柱或改動系統(tǒng)時均需執(zhí)行效率測試。在系統(tǒng)使用過程中,應(yīng)定期執(zhí)行效率測試。

如果正常操作色譜柱的過程中發(fā)生問題,請重復(fù)初始效率測試的步驟并對比結(jié)果。在非串聯(lián)條件下執(zhí)行柱效測試,可用于監(jiān)測儀器譜帶展寬現(xiàn)象。譜帶展寬過大的問題需在色譜柱安裝之前得到解決。

 

1)測試儀器譜帶展寬

測試步驟

合理操作的系統(tǒng)的譜帶展寬應(yīng)當(dāng)小于150 μL(對于溶劑高效色譜柱,譜帶展寬應(yīng)小于75 μL)。測定系統(tǒng)譜帶展寬的方法:

1. 從系統(tǒng)中取出色譜柱。

2. 用零死體積接頭連接入口與出口管件。

3. 將流速設(shè)置為1.0 mL/min。

4. 使用較快的紙速可獲得易于測量峰寬的色譜峰。如果使用的是數(shù)據(jù)系統(tǒng),請將采樣速率設(shè)置為每秒至少10個數(shù)據(jù)點(diǎn)。用戶可能需要調(diào)節(jié)檢測器靈敏度以保持色譜峰以合適的尺寸顯示。

                                              image.png

5. 注入與塔板數(shù)測定分析相同的樣品(見表4、56)。

6. 在所得峰的4.4%峰高處測量峰寬,以獲得μL值。

5顯示了5 sigma方法,其中峰寬(w)在峰高(h)的4.4%處測得。

 

2)柱效測試

下文列出的柱效測試步驟可用于計算理論塔板數(shù),該參數(shù)是衡量系統(tǒng)色譜柱效率的指標(biāo)。

溶劑無需使用色譜柱出廠溶劑測定色譜柱的效率。使用不同的溶劑時,測得的初始塔板數(shù)將會不同。請使用常規(guī)操作溶劑分別測試色譜柱。

 

測試步驟

柱效測試的方法:

1. 對于HR 0.5、HR 1HR 2HR 4E色譜柱,將流速緩慢增至1.0 mL/min;對于所有其它色譜柱,將流速增至2.0 mL/min。

2. 適當(dāng)調(diào)節(jié)檢測器衰減,使色譜峰達(dá)到全尺寸的70%(噪音水平小于全尺寸的0.5%)。

3. 將記錄儀紙速設(shè)置為50 mm/min,或?qū)?shù)據(jù)系統(tǒng)采集速率設(shè)置為每秒至少5個數(shù)據(jù)點(diǎn)。

4. 標(biāo)記溶液的進(jìn)樣體積最高為20 μL。溶液標(biāo)記物最高濃度為10%。對于溶劑高效色譜柱,進(jìn)樣體積最多5 μL溶液。

關(guān)于執(zhí)行效率測試時所用的標(biāo)記物,請參閱表4、表5或表6

5. 記錄保留時間、儀器設(shè)置和色譜柱配置,以便將來校準(zhǔn)時可以準(zhǔn)確重復(fù)各項條件。

6. 采用正切法計算塔板數(shù)(見圖6)。利用這些結(jié)果對色譜柱整個壽命期內(nèi)的性能進(jìn)行比較。

7. 當(dāng)任何色譜柱的塔板數(shù)低于初始值30%以上時,應(yīng)更換色譜柱。

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