ACQUITY UPLC BEH Amide, 130?, 1.7μm糖基分析專(zhuān)用柱
I. 簡(jiǎn)介
感謝您選擇沃特世(Waters®)ACQUITY UPLC® BEH Amide, 130?糖基分析專(zhuān)用柱,該色譜柱適用于以HILIC模式分離2-氨基苯甲酰胺(2-AB)、2-氨基苯甲酸(2-AA)或沃特世RapiFluor-MS™
(部件號(hào)176003635)標(biāo)記的糖基。該色譜柱填料以及本手冊(cè)中推薦的UPLC®儀器條件能夠分離中性和帶電荷物質(zhì)。2-AB、2-AA或RapiFluor-MS標(biāo)記的糖基基于分子的親水性而得到保留,親水性與流體動(dòng)力學(xué)體積或分子大小存在顯著相關(guān)性。該色譜柱的高分離能力部分得益于全多孔填料的小粒徑(1.7 μm)。其化學(xué)和機(jī)械穩(wěn)定性則歸功于色譜柱的顆粒組成采用了沃特世亞乙基橋雜化(BEH Technology™)技術(shù)。
分析人員可使用帶有標(biāo)記的沃特世葡聚糖校準(zhǔn)曲線(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)色譜柱進(jìn)行校準(zhǔn),我們提供適用于2-AB、2-AA或RapiFluor-MS的葡聚糖校準(zhǔn)曲線(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)品,部件號(hào)分別為186006841、186007279、186007982,這樣就可以使用葡萄糖單位(GU)來(lái)表示洗脫。在建議的色譜條件下,分析人員可基于各種單糖組分的親水貢獻(xiàn)值預(yù)測(cè)沃特世RapiFluor-MS、2-AB或2-AA標(biāo)記的寡糖在ACQUITY UPLC BEH Amide, 130?, 1.7μm糖基分析專(zhuān)用柱上的保留情況。
ACQUITY UPLC BEH Amide, 130?糖基分析專(zhuān)用柱采用的是具有UltraPerformance LC®特性的1.7 μm顆粒。小粒徑填料減小了擴(kuò)散和譜帶展寬,從而使分析人員在糖基分離中可獲得
更高的分離度、靈敏度和分析速度。通常此類(lèi)小粒徑填料會(huì)導(dǎo)致極高的系統(tǒng)反壓。分析人員可采用具有高耐壓能力的ACQUITY UPLC、ACQUITY UPLC H-Class和ACQUITY UPLC H-Class Bio
系統(tǒng)進(jìn)行UPLC糖基分析。在HILIC模式下,反壓會(huì)隨著梯度過(guò)程中水相比例的增加而增高。如果在重新平衡之前選擇進(jìn)行水溶液清洗,則分析人員必須降低流速以防止反壓過(guò)高。
注:ACQUITY UPLC BEH Amide, 130?, 1.7μm糖基分析專(zhuān)用柱經(jīng)過(guò)優(yōu)化設(shè)計(jì),適用于與ACQUITY UPLC、ACQUITY UPLC H-Class和ACQUITY UPLC H-Class Bio系統(tǒng)配套使用。如果將該色譜柱用于傳統(tǒng)HPLC系統(tǒng),則將由于嚴(yán)重?cái)U(kuò)散和壓力限制而無(wú)法獲得預(yù)期的分離效果。
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